アクティブボード・２０１３年１２月
　　　　　・・・・・２０１３年１２月　７日更新・・・・・

研究発表を行った学会；
・第３６回日本分子生物学会年会
　２０１３年１２月　３日〜　６日（神戸）
タイトル；呼吸鎖複合体III形成におけるAAA分子シャペロンBcs1pのN末端の機能解析.
発表者；澤村　理英　氏
　　　（熊本大学　発生医学研究所　分子細胞制御分野）
Abstract；
　Bcs1pは、出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）のミトコンドリア呼吸鎖複合体IIIの会合に必須なAAAファミリータンパク質に分類される分子シャペロンである。特に、呼吸鎖複合体IIIの活性中心サブユニットの一つであるリスケ鉄硫黄タンパク質（Rip1p）の未成熟複合体IIIへの組込みに必須であると考えられている。Bcs1pはミトコンドリア内膜に局在する、一回膜貫通タンパク質である。複合体IIIの会合に必須なAAAドメインを含むC末端領域はマトリクス側に位置している。一方、膜間部側に位置するN末端領域の重要性については明らかになっていない。本研究の目的は、このN末端領域の複合体III会合に対する影響について明らかにすることである。
　まず、N末端領域において、どの残基がBcs1pの機能に重要であるか検討するため、膜間部側44残基の様々な欠失変異株Bcs1pを発現する酵母株を作製した。その結果、38-40残基を欠失させたBcs1pを持つ酵母は、Bcs1p欠損株と同様に呼吸能不全を示し、その中でも特にLeu38欠損が最も呼吸能低下を示した。さらに、この疎水性残基であるLeu38を他のアミノ酸に置換したところ、Aspといった親水性アミノ酸に置換した場合において、呼吸能不全が顕著であった。これら呼吸能不全を示した変異株のミトコンドリアを単離し、Blue Native-PAGEで複合体III形成への影響を検討したところ、未成熟複合体IIIの蓄積がみられた。さらに、ミトコンドリア内でのRip1pの局在を検討したところ、呼吸能不全変異株のRip1pはマトリクスに局在していることが分かった。
　これらの結果から、Bcs1pのN末端領域は、複合体III会合におけるRip1pのマトリクスから未成熟複合体IIIへの移動・会合に重要であることが示唆された。